特化蚁星级转换酶是一种用于PCR和基因克隆的酶,可以将RNA转录成cDNA。
以下是使用特化蚁星级转换酶的步骤:
1. 准备反应体系:将需要转录的RNA加入反应管中,加入特化蚁星级转换酶、逆转录缓冲液、dNTP混合物和RNase抑制剂,混合均匀。
2. 反应:将反应管放入PCR仪中,在50-55°C下反应10-60分钟。反应结束后,加热灭活酶5-10分钟,以停止反应。
3. 存储cDNA:将反应混合物转移到新的管中,可在-20°C下存储cDNA。
值得注意的是,特化蚁星级转换酶对RNA的质量和纯度要求较高,因此在使用前应先对RNA进行质量检测和纯化处理。