自行车不可以上高速。非机动车以及其他设计最高时速低于七十公里的机动车，不得进入高速公路。高速的最低速度要求都是六十，而以自行车的速度是不可能达到六十的。另外高速只有机动车可以上去，自行车属于非机动车，是禁止上高速的。
《道路交通安全法》第六十七条
行人、非机动车、拖拉机、轮式专用机械车、铰接式客车、全挂拖斗车以及其他设计最高时速低于七十公里的机动车，不得进入高速公路。高速公路限速标志标明的最高时速不得超过一百二十公里。
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