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酶偶联反应法

发布时间:2023-09-08 03:23:50

酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,可以用指示酶的反应速度来代表待测酶的活性。

酶偶联反应法

酶偶联反应法详细介绍

酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,可以用指示酶的反应速度来代表待测酶的活性。

方法示例

在酶活性测定时,如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定,可采用。例如:

Ex Ea Ei

酶偶联反应法

A → B → C→p

式中A为底物,B、C为中间产物,P为可直接测定的产物;Ex为待测酶,Ea和Ei都为工具酶,依据工具酶作用的不同又分别称为辅助酶和指示酶;辅助酶在酶偶联反应中可以一个或多个,也可以不需要;指示酶是指能监测反应速度的酶。临床酶学分析中,以NAD(P)H/ NAD(P)+为辅酶的脱氢酶和以H2O2为底物的过氧化物酶(POD)是常用的指示酶。

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