狭义的酯酶也有指水解低级脂肪酸酯的脂肪酶。再者蛋白酶催化氨基酸等的酯水解反应时，也具有酯酶作用。根据反应条件不同反应也可逆行，但在生理上是向分解方向进行的。另外，也有进行基团转移反应的，则不易与转移酶（transfe－rase）区别。
狭义的酯酶也有指水解低级脂肪酸酯的脂肪酶。再者蛋白酶催化氨基酸等的酯水解反应时，也具有酯酶作用。根据反应条件不同反应也可逆行，但在生理上是向分解方向进行的。另外，也有进行基团转移反应的，则不易与转移酶（transfe－rase）区别。
可在水分子的参与下，经由水解作用，将酯类切割成酸类与醇类。此类酶参与多种生物化学反应，依其专属受质、蛋白质结构，以及功能而有不同。
酯+H2O→酸+OH化合物。
按照作用的底物的种类进行分类：
（1）羧酸酯，例如脂酶，胆碱酯酶；
（2）硫酯；
（3）磷酸单酯，磷酸单酯酶，例如碱性磷酸酶；
（4）磷酸二酯，磷酸二酯酶，例如核酸酶，磷脂酶；
（5）硫磷酸酯；
（6）硫酸酯，硫酸酯酶。（数字为酶编号的第三位数字）。
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