三维试验是利用AmpC酶可抑制头孢西丁的原理，用冻融法或超声粉碎法粗提细菌中的β-内酰胺酶，观察酶粗提物对头孢西丁的抑制情况。三维试验是公认的、较为经典的检测(去阻遏)持续高产AmpC酶的方法，也是检测质粒AmpC酶最好的方法。但缺点是需增菌、破碎细菌细胞并提取酶的粗提物，操作繁琐、费时，难以在临床微生物实验室常规应用。
三维试验是利用AmpC酶可抑制头孢西丁的原理，用冻融法或超声粉碎法粗提细菌中的β-内酰胺酶，观察酶粗提物对头孢西丁的抑制情况。三维试验是公认的、较为经典的检测(去阻遏)持续高产AmpC酶的方法，也是检测质粒AmpC酶最好的方法。但缺点是需增菌、破碎细菌细胞并提取酶的粗提物，操作繁琐、费时，难以在临床微生物实验室常规应用。
三维试验是利用AmpC酶可抑制头孢西丁的原理，用冻融法或超声粉碎法粗提细菌中的β-内酰胺酶，观察酶粗提物对头孢西丁的抑制情况。如果粗提物中有AmpC酶存在，即可抑制头孢西丁的活性，使其周围对头孢西丁敏感的大肠埃希菌得以生长；反之，大肠埃希菌受头孢西丁的抑制则不能生长。三维试验利用酶的粗提物而不是活菌作检测，不受抗生素的诱导影响。
操作方法：
①制备β-内酰胺酶的粗提物：增菌后收集细菌，用冻融法或超声粉碎法破碎细菌细胞，使其菌体内的酶释出，再离心去除细菌碎片，收集上清液，即为β-内酰胺酶的粗提物(用头孢硝噻吩纸片确定有8．内酰胺酶的存在)。
②三维试验：将大肠埃希菌标准菌株ATCC25922按CLSI的K-B纸片扩散方法涂布在M-H平板上，在平板的中央贴一张FOX纸片，从距离纸片5 mm处用无菌刀片在平板的琼脂上向外缘方向(离心方向)切一
裂隙，每一裂隙中加入25～30ul待检菌株的β-内酰胺酶粗提物，35℃培养18～24h，观察裂隙的内侧端(头孢西丁纸片的抑菌圈内)周围有无细菌生长。
三维试验是公认的、较为经典的检测(去阻遏)持续高产AmpC酶的方法，也是检测质粒AmpC酶最好的方法。但缺点是需增菌、破碎细菌细胞并提取酶的粗提物，操作繁琐、费时，难以在临床微生物实验室常规应用。
温馨提示：
