核酸杂交技术

核酸杂交技术是一种分子生物学的标准技术，用于检测DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。

核酸杂交技术详细介绍

核酸杂交技术是一种分子生物学的标准技术，用于检测DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。

核酸杂交技术基本信息

DNA或RNA先转移并固定到硝酸纤维素或尼龙膜上，与其互补的单链DNA或RNA探针用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时，探针通过氢键与其互补的靶序列结合，洗去未结合的游离探针后，经放射自显影或显色反应检测特异结合的探针。

核酸杂交技术DNA印迹杂交

DNA印迹杂交（DNA blot hybridization）：

1：将DNA或RNA溶液直接点样于硝酸纤维素膜或尼农膜上（斑点或狭线印迹）

2：经琼脂糖凝胶电泳将片段的DNA或RNA转移到膜上（Southern和Northern印迹法）。DNA在电泳前先用限制性内切酶消化。

核酸杂交技术RNA印迹杂交

RNA印迹杂交（RNA blot hybridization）：

核酸杂交技术斑点杂交

将少量核酸样品点样在硝酸纤维素滤膜上，80℃烘烤后可牢固地固定在膜上，再用探针进行杂交。尼龙膜，特别是聚偏氟乙烯（PVDF）与DNA结合力更高，坚韧、易操作。点样可手工，也可用手工点样品。检测可用放射性探针自显影或非放射性探针显色。

核酸杂交技术原位杂交

在保持细胞形态条件下，进行细胞内杂交，显影或显色。可用于DNA或RNA分析。荧光原位杂交（FISH）进行染色体DNA分析可用于生物学研究的许多领域以及临床细胞遗传学研究。其主要优点是不仅可以在细胞分裂的中期，而且可在分裂间期核中诊断染色体的变化。